随着
多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱,本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流,多家厂家共同努力,已经把光栅技术推到了历史新高。在光栅的众多技术参数之中,zui关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的正确性了。
杂光率指得就是光源通过光栅后,得到的光线中,“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例,表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性,无论使用滤光片还是光栅,杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地往掉。一般来说,滤光片型的杂光率在10-4——10-5之间,光栅型的可以做到10-6——10-7。由于此类杂光是非特异的,而且会直接进进zui后的检测器,所以有多少的杂光就会引进多少的随机误差。在荧光等检测过程中,由于检测器存在放大效应,杂光率的干扰也会被指数级放大。因此,杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。
光栅的另一个重要指标就是波长选择的正确性。由于很多检测是依靠于物质在某个波长的特征图谱。就像DNA/RNA的OD260浓度测定,实际检测波长偏离260nm几个nm以上的话,OD值与*浓度之间的数学关系就会发生改变。因此,一组性能优良的光栅系统,他的波长选择正确性应该是在±0.5——1nm之间。波长偏离过大有时就会影响到*结果的正确性。
这两个可谓是光栅甚至滤光片滤光系统zui关键的技术参数,直接影响到的是得到数据是否是真正所要丈量的结果,是实验结果可靠性的zui基本要求。
多功能酶标仪的分类方法众多,但zui简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(实在也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。目前常规多功能酶标仪中zui高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,比较适合常规实验。